总蛋白浓度Lowry法测试

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信息概要

总蛋白浓度Lowry法测试是一种基于Folin-酚试剂反应的经典生物化学检测方法，用于定量测定样品中的蛋白质含量。该测试通过蛋白质与铜离子在碱性条件下形成复合物，然后与Folin试剂反应产生颜色变化，从而通过光度计测量吸光度来计算浓度。检测总蛋白浓度在生物医学研究、临床诊断、药品开发和食品分析中至关重要，因为它有助于评估样品纯度、监控细胞培养过程、诊断疾病（如肝肾功能异常），以及确保产品质量和安全性。该方法以其高灵敏度和准确性而广泛应用，但需注意干扰物质的影响。

检测项目

总蛋白浓度，样品吸光度，标准曲线线性，反应时间优化，pH值控制，温度影响，干扰物质筛查，试剂稳定性，样品预处理，重复性测试，准确性验证，灵敏度评估，特异性分析，回收率计算，检测限确定，定量限评估，批间变异，样品稀释倍数，蛋白质类型适用性，环境条件监控

检测范围

血清蛋白，血浆蛋白，细胞裂解液，组织匀浆，尿液样本，牛奶制品，食品提取物，发酵液，培养基，酶制剂，抗体溶液，疫苗产品，诊断试剂，生物药品，环境水样，植物提取物，动物饲料，化妆品样品，医药原料，工业废水

检测方法

Lowry法：基于蛋白质与铜离子和Folin-酚试剂的显色反应，通过分光光度计测量吸光度。

标准曲线法：使用已知浓度的蛋白质标准品绘制曲线，用于样品浓度计算。

样品稀释法：将样品适当稀释以避免吸光度超出线性范围。

空白校正法：设置试剂空白对照，消除背景干扰。

pH调节法：控制反应体系的pH值在碱性条件（约10-11）。

温度控制法：在恒定温度（如室温或37°C）下进行反应，确保重现性。

时间控制法：精确控制显色反应时间，通常为10-30分钟。

干扰消除法：通过添加抑制剂或预处理去除干扰物质（如脂类或还原剂）。

重复测定法：对同一样品进行多次测量，评估精密度。

回收率测试法：添加已知量蛋白质到样品中，计算回收率以验证准确性。

灵敏度测试法：确定方法的最低检测限和定量限。

特异性评估法：检查方法对不同蛋白质类型的响应差异。

稳定性测试法：评估试剂和样品在储存期间的稳定性。

仪器校准法：定期校准分光光度计，确保测量准确性。

数据统计法：使用统计软件分析结果，计算平均值和标准差。

检测仪器

分光光度计，微量移液器，恒温水浴锅，离心机，pH计，分析天平，涡旋混合器，比色皿，标准曲线软件，试管架，计时器，冰箱，干燥箱，安全柜，数据处理系统

总蛋白浓度Lowry法测试的常见问题：1. 问：Lowry法测试总蛋白浓度时，哪些物质可能干扰结果？答：常见干扰物质包括还原剂（如DTT）、脂类、去污剂或某些缓冲液成分，它们可能影响显色反应，需通过预处理或空白校正消除。2. 问：如何确保Lowry法测试的准确性？答：应使用高质量标准品绘制标准曲线，控制反应条件如pH和温度，并进行重复测试和回收率验证以提高可靠性。3. 问：Lowry法适用于哪些类型的蛋白质样品？答：该方法广泛适用于血清、细胞提取物等生物样品，但对于含高浓度干扰物的样品（如食品或环境样本），需优化预处理步骤。

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。