免疫组织化学定位检测

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信息概要

免疫组织化学定位检测是一种利用抗原抗体特异性结合反应，通过显色剂显色，在组织切片或细胞涂片上原位确定特定抗原（蛋白质或多肽）分布与定位的技术。该检测对于疾病诊断（尤其是肿瘤的鉴别诊断、分型和预后判断）、生物标志物研究、药物靶点定位以及生命科学基础研究至关重要。其检测信息核心在于通过特异性抗体可视化目标抗原在组织细胞中的精确位置，从而提供形态学背景下的功能信息。

检测项目

抗原修复效果评估，抗体特异性验证，背景染色水平，阳性信号定位准确性，染色强度均一性，非特异性结合控制，细胞核复染质量，组织形态完整性，阳性对照符合性，阴性对照符合性，内源性过氧化物酶活性，内源性生物素活性，切片厚度一致性，封片质量，信号稳定性，交叉反应评估，抗体稀释度优化，显色时间控制，组织固定效果，抗原保存状态

检测范围

石蜡包埋组织切片，冰冻组织切片，细胞爬片，组织芯片，骨髓涂片，体液离心涂片，穿刺活检样本，手术切除样本，动物模型组织，植物组织切片，微生物涂片，口腔黏膜刮片，皮肤组织切片，神经组织切片，肿瘤组织阵列，胚胎组织，器官移植样本， forensic样本，考古生物样本，培养细胞片

检测方法

直接法：使用标记有酶或荧光素的单克隆或多克隆抗体直接与组织抗原结合，步骤简单，特异性高。

间接法：使用未标记的一抗与抗原结合后，再用标记的二抗与一抗结合，可进行信号放大。

过氧化物酶-抗过氧化物酶法：利用PAP复合物与二抗结合，进一步放大信号，提高灵敏度。

亲和素-生物素复合物法：利用生物素与亲和素的高亲和力，形成复合物以放大检测信号。

链霉亲和素-生物素法：以链霉亲和素替代亲和素，减少非特异性背景染色。

酪胺信号放大法：通过酪胺底物的沉积反应实现信号大幅度放大，用于低丰度抗原检测。

多色荧光免疫组化：使用不同荧光素标记的抗体，同时检测多种抗原并进行共定位分析。

自动化免疫组化染色法：采用全自动染色仪进行标准化操作，提高结果的可重复性。

抗原修复法：通过热或酶处理暴露因固定而被遮蔽的抗原表位，包括柠檬酸缓冲液热修复、EDTA修复等。

冰冻切片免疫组化法：对未经过石蜡包埋的快速冰冻组织切片进行染色，更好地保存抗原活性。

双重免疫组化染色法：在同一张切片上先后使用两种不同显色系统标记两种不同抗原。

免疫金银法：采用胶体金或银增强技术进行标记，常用于电镜或高分辨率观察。

定量免疫组化分析：通过图像分析软件对染色强度和阳性区域进行定量测量。

多重免疫荧光法：利用多轮染色与淬灭或光谱分离技术，实现多个靶标的同时检测。

原位杂交免疫组化结合法：将免疫组化与核酸原位杂交结合，同时检测蛋白质和核酸。

检测仪器

显微镜，组织切片机，烤片机，摊片机，自动染色机，高压锅，微波炉，水浴锅，pH计，移液器，温箱，湿盒，荧光显微镜，共聚焦显微镜，图像分析系统，酶标仪

问：免疫组织化学定位检测在肿瘤诊断中主要有什么作用？ 答：其主要作用包括确定肿瘤的组织来源、进行病理分型、评估肿瘤的恶性程度、检测特定的生物标志物以指导靶向治疗以及判断预后。 问：为什么在免疫组织化学检测中必须设置阳性和阴性对照？ 答：设置阳性对照是为了验证检测体系的有效性和抗体的活性；设置阴性对照是为了排除非特异性染色和背景干扰，确保检测结果的准确性和特异性。 问：抗原修复在免疫组织化学定位检测中为何至关重要？ 答：因为组织固定过程会使蛋白质交联，遮蔽抗原表位，抗原修复可以逆转这种遮蔽效应，使抗体能够有效地与目标抗原结合，从而提高检测的灵敏度和成功率。

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。